Лабораторное оборудование
Медтехника современной клинической лаборатории
Главная страница / Принципы работы лабораторных приборов / Флуориметрия
|
Лабораторное оборудование
|
В основе флуориметрических измерений лежит тот факт, что некоторые молекулы излучают свет характеристического спектра (спектр испускания) немедленно после поглощения ими электромагнитной энергии и перехода в возбужденное состояние (явление флуоресценции). Степень, до которой молекулы возбуждаются, зависит от амплитуды и длины волны лучевой энергии в спектре возбуждения. В этом процессе небольшая часть энергии теряется, что приводит к тому, что спектр испускания в целом лежит в более длинноволновой области, чем спектр возбуждения.
Во флуориметрах различной чувствительности используются разнообразные источники излучения, волновые селекторы и регистрирующие схемы. В качестве источника излучения обычно используются ртутные дуговые лампы. Они выдают линейчатый спектр с максимумами на 365, 405, 436 и 546 нм. В качестве детекторов обычно используются фотоумножители. Уникальным свойством этих устройств является необходимость выбора рабочей полосы частот для двух спектров - возбуждения и испускания.
Одним из преимуществ флуориметрии является более высокая чувствительность, которая может на четыре порядка превышать чувствительность фотометрических методов. Это происходит потому, что в фотометрических методах для определения неизвестной концентрации анализируемого вещества в образце измеряется разность в поглощении между раствором, содержащим нулевую концентрацию анализируемого вещества (%Т = 100) и анализируемым образцом. В случае сильно разбавленных образцов (для которых, например, %Т = 98), небольшие отклонения в процессе измерения могут привести к большим относительным ошибкам в результатах. В случае флуориметрии, наоборот, осуществляется прямое измерение флуоресценции образца для определения неизвестной концентрации содержащегося в нем анализируемого вещества.
|
|
|
|||
